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細胞活化培養基的常見(jiàn)問(wèn)題三則分享
更新時(shí)間:2022-01-20
技術(shù)文章
細胞活化培養基
既是培養細胞中供給細胞營(yíng)養和促使細胞生殖增殖的基礎物質(zhì),也是培養細胞生長(cháng)和繁殖的生存環(huán)境。今天小編就大家講講其幾個(gè)常見(jiàn)的問(wèn)題。
哪種培養基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養基中用作PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類(lèi)激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類(lèi)反應,培養細胞,尤其是哺乳類(lèi)細胞時(shí),用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時(shí),不使用加有酚紅的培養基。
貯存在冰箱中的瓶口已開(kāi)的培養基,在放置幾天后顏色變紫?
這主要是由于在暴露到周?chē)腃O2水平時(shí),碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開(kāi)瓶口,在CO2培養箱孵育培養基10-15分鐘,來(lái)校正溶液的pH值(確定松開(kāi)瓶口以保證氣體交換)
血清解凍后發(fā)現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì )存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。不使用過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞過(guò)濾膜。為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,培養ES細胞、平滑肌細胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
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